眾所周知,奶牛結核病和布魯氏菌?。ㄏ路Q(chēng)布?。┦侨诵蠊不疾?。為了保障人民群眾的身體健康,為奶牛檢測結核病和布病,淘汰感染奶牛,凈化奶牛群,具有很重要的現實(shí)意義。對于結核病,我站從柳州市有奶牛場(chǎng)以來(lái)就開(kāi)始檢測,歷時(shí)約50年,布魯氏菌病從20世紀80年代開(kāi)始檢測。在多年檢測過(guò)程中,形成了一套比較高效、成熟的檢測程序,現總結如下。
1 接種牛型結核菌素和采血過(guò)程
奶牛場(chǎng)飼養員保定好奶牛后,工作人員就在奶牛頸中部上1/3處刮毛,直徑為10cm,用游標卡尺測皮厚并登記,在測皮厚處皮內注射2 000IU牛型結核菌素,然后從頸靜脈采血5ml左右裝入試管,在試管上貼上標簽,標簽上注明場(chǎng)址、畜主姓名、牛耳牌號、采血時(shí)間,并且斜放試管,等試管內血液凝固釋放出血清后,就可以離開(kāi)牛奶場(chǎng)。把當天采的所有奶牛場(chǎng)奶牛血分場(chǎng)整理好后送到獸醫化驗室檢測布魯氏菌病。
2 實(shí)驗室布魯氏菌病的檢測
(1)首先把各奶牛場(chǎng)采來(lái)的血分離血清并裝入2ml離心管中,做好標記,依次放在小型試管架上。
(2) 取潔凈方型玻璃板放在操作臺上,用微型移液器依次吸取待檢牛血清20μl滴在玻璃板上,每份待檢血清相距3cm,然后吸取等量虎紅平板試驗抗原在待檢血清旁邊,再用干凈牙簽把待檢血清和抗原混勻,4min內觀(guān)察結果,任何程度的凝集均判為陽(yáng)性,完全無(wú)凝集現象判為陰性,陽(yáng)性血清另做試管凝集試驗再做判斷,最后用補體結合反應試驗來(lái)確診 。
3 牛型結核菌素皮內接種變態(tài)反應結果判斷
當奶牛接種72h后,用游標卡尺測量接種部位的皮厚,與原皮厚比較:小于2mm判為陰性,大于2mm而小于4mm判為可疑,等于或大于4mm判為陽(yáng)性;對于可疑的間隔30天后復檢,復檢仍為可疑的判為陽(yáng)性。
4 檢測結果處理
對于結核病或布病檢測結果確診為陽(yáng)性的奶牛進(jìn)行撲殺淘汰,飼養場(chǎng)地嚴格消毒。
5 小結和建議
(1)采血試管最好用人用一次性塑料試管,分離血清裝入2ml容量的一次性小型帶蓋離心管,這樣不僅可以節省采血前后的大量消毒、清洗、分裝、 高熱滅菌的人力、物力,還可以減少容器對樣品的污染,提高檢樣的準確率,同樣消除了因清理血樣造成對環(huán)境的污染。
(2) 刮毛用具的改進(jìn),提高了工作效率。以前檢測牛結核病前,是用剪刀剪毛,這種方式剪毛慢且不能干凈地剪去毛腳。近幾年我站技術(shù)人員改用刮須刀,其優(yōu)勢是刮毛干凈,量皮厚準確,在接種結核菌素時(shí)非常方便快捷。如果把刮須刀固定夾伸出部分去掉打磨平整,這樣所刮毛就不會(huì )夾在里面,不會(huì )在刮毛中途停下來(lái),一直刮夠所需面積,從而大大提高工作效率。
(3)牛頸皮厚測量,專(zhuān)人專(zhuān)管。量一個(gè)牛奶場(chǎng)牛的皮厚,最好固定某一個(gè)人測量,在接種結核菌素72h后,還是由原來(lái)那個(gè)人復測,這有利于檢測結果的準確性,而大大消除了不同人測量的人為影響因素而引起的誤差。
(4)每進(jìn)一個(gè)牛場(chǎng)檢疫人員都要消毒,所用檢測工具全部經(jīng)過(guò)消毒或換新,所用的血樣容器盒一場(chǎng)一個(gè)。在每個(gè)牛場(chǎng)采樣所產(chǎn)生的垃圾,全部裝入塑料袋扎緊,帶回獸醫站化驗室集中,然后統一拿到市化制場(chǎng)焚燒銷(xiāo)毀。
(5)做好檢疫牛場(chǎng)牛的相關(guān)記錄。記錄是很重要的一環(huán),注意記清楚奶牛場(chǎng)場(chǎng)址、負責人姓名、牛耳標號、初始頸側皮厚;裝血試管上的標簽記錄與記錄本的要一一對應,這有利于實(shí)驗室檢測布病時(shí)能清楚有序地進(jìn)行,對于產(chǎn)生陽(yáng)性或疑似陽(yáng)性的奶牛血清方便重檢。
(6) 實(shí)驗室做布病虎紅平板凝集試驗在玻璃板上滴待檢血清時(shí),已知抗原滴在其旁邊,注意滴頭不要沾上待檢血清,這樣可以避免污染下一個(gè)待檢血清,保證每個(gè)檢樣結果的準確性;如果把檢測秩序反過(guò)來(lái),即先滴已知抗原,后加待檢血清就不存在污染問(wèn)題了,因為每個(gè)待檢血清用后都要換滴頭,同時(shí)可以就該滴頭混勻抗原和血清,然后再換滴頭加下一個(gè)樣品,以此做下去,可以免掉用牙簽混勻這一步。
(7)對于結核病和布魯氏菌病的檢疫、檢測,只要測出是陽(yáng)性牛,本站在上級部門(mén)的支持下,給予養殖戶(hù)適當的補償,進(jìn)行堅決的撲殺和淘汰,從而杜絕了市民從飲奶上感染結核病和布魯氏菌病,保證了市民飲健康奶。